《光阻法測定乳狀注射液中大于5μm的乳粒》藥典解讀

《光阻法測定乳狀注射液中大于5μm的乳粒》藥典解讀

摘要：乳狀注射液中尾部大顆粒的含量對于其質量安全性有重要影響，本文圍繞著中國藥典《光阻法測定乳狀注射液中大于5μm的乳粒》一章節，以奧法美嘉公司的Accusizer A7000 APS設備為例，探究了光阻法的工作原理及其測量規范要求：粒徑及濃度的準確性和重復性，并對乳狀注射液中大于5μm的乳粒做了相應的規范要求，為國內脂肪乳的研發與生產提供參考。

關鍵詞：光阻法、乳狀注射液、5μm、尾部大顆粒、Accusizer A7000 APS

背景介紹

乳狀注射液又稱脂肪乳注射液，是水包油的分散體系, 外觀呈半透明或不透明的乳狀液體, 為熱力學不穩定體系。其制備工藝一般采用高壓均質法或微射流法, 無論采用哪種制備方法, 脂肪乳的粒徑都無法得到均一的值, 存在一定粒徑分布范圍。

通常, 在脂肪乳中,當油脂的密度低于周圍水媒介密度約10%時, 乳析現象就會產生。乳析的乳劑只要輕輕攪拌, 乳滴仍能重新分布。但當脂滴合并成直徑超過1μm的大脂滴時, 脂滴的合并便是不可逆的過程, 脂滴會逐漸聚集, 1μm脂滴可“生長”成 5μm
甚至更大的脂滴顆粒, 直至自由脂滴從乳劑中析出，成為不穩定脂肪乳。

當直徑大于5μm的乳滴占脂肪乳油相體積的百分比 (volume weighted percent of fat greater than five micrometers, PFAT5) 超過0.05%時, 會影響脂肪乳的穩定性, 臨床上產生有效性隱患和安全性風險，也就是說, 脂肪乳的 PFAT5 的值會直接影響脂肪乳的質量。因此, 在尾部大顆粒控制中, 通常選擇5μm作為尾部大顆粒測定的閾值。

工作原理

乳狀注射液中5μm以上大乳粒的比例，可采用基于光阻（光消減）原理的單粒子光學傳感技術進行測定。單個粒子通過狹窄的光感區時阻擋了一部分入射光，引起到達檢測器的入射光強度瞬間降低，強度信號的衰減幅度理論上與粒子橫截面（假設橫截面積小于光感區的寬度），即粒子直徑的平方成比例。用系列標準粒子建立粒徑與強度信號大小的校正曲線。儀器測得樣品中乳粒通過光感區產生的信號，根據校正曲線計算出乳粒的粒徑及加權體積。使用單粒子光學傳感技術傳感器時，需知道重合限與*佳流速。 

驗證標準（對儀器）

將儀器的閾值設為 1.8mm，上限為 50mm。分別測定5mm、10mm兩種規格的標準粒子，每一種標準粒子檢測三次，所測得的標準粒子的平均數均粒徑的相對標準偏差應不大于10％，與其標示值的偏差應小于10％。此外，所測得的每毫升標準粒子的數目應在標準粒子標示濃度的±10％以內。

驗證標準（對乳液）

如果儀器配有自動稀釋系統，直接用注射器或聚四氟乙烯管線將高濃度的樣品注入儀器中，由儀器自動稀釋至適合的濃度再進行檢測；如果儀器不具備自動稀釋功能，則需手動稀釋（第一次至少稀釋10倍），在預先經0.2mm 孔徑過濾器過濾并經超聲脫氣的水中加入適量乳狀注射液，緩慢攪拌得到輕微渾濁的均勻混懸液。無論哪種稀釋方式，最終粒子濃度均應低于傳感器的重合限。將檢測器的閾值設為1.8mm，上限為50mm，測定樣品，每個樣品測定3次。按下式計算大于5mm的乳粒加權總體積占油相體積的百分比，其結果不得超過0.05%。

PSS Accusizer A7000 APS

PSS粒度儀公司隸屬美國Entegris公司，其品牌旗下的Accusizer系列APS型號設備是一款典型的光阻法原理的設備，采用SPOS單顆粒光學傳感技術，通過對樣品進行自動稀釋，有效避免了人工操作導致的檢測誤差，集檢測、數據處理及自動沖洗等功能一體，操作便捷、高效。

按照上述藥典要求，使用Accusizer A7000 APS光學粒度分析儀測試5mm和10mm的混合標粒（批號：UH13A），連續測試3次，結果如下圖所示：

圖1：第一次測試

圖2：第二次測試

 圖3：第三次測試

圖4：標粒證書

如上圖所示，5mm和10mm的粒徑測試結果與證書標示值的偏差小于10%，且相對標準偏差與所測粒子濃度也小于10%，符合中國藥典要求。

使用Accusizer A7000 APS測試乳狀注射液，結果如下圖所示：

圖5：乳劑測試結果

檢測過程中，儀器采用自動化設計，報告模板按照藥典標準，可直接給出合格/失敗的判定，給用戶帶來極大的方便。

參考資料

中國藥典：光阻法測定乳狀注射液中大于5mm的乳粒